欢迎来到冠亚体育病毒网站! 加入收录 | 接洽我们
   常用品牌:   Biosharp
   
广告动态
技术文档
商品促销
 首页  >  广告资讯  >  信息注释
免疫力组化操作执行序列
发布人:viking2000    看下 1683 次    时间:2012年12月19日    
(一)、仪器设备
  1. 18cm白口铁煲或壁炉或用冰箱.
  2. 水浴箱
(二)、试 剂
  1. PBS弛缓液(pH7.2D7.4)
  2.0.01mol/L柠檬酸钠弛缓液(CB,pH 6.0,1000ml
  3.0.5mol/L EDTA弛缓液(pH 8.0)
  4. 1mol/L的TBS弛缓液(pH 8.0)
  5. 酶消化液:a. 0.1%肠激酶   b.0.4%胃氨基酸液
  6. 3%阿尼林DH2O2溶胶
  7. 风裱剂:a. 阿尼林和0.5mmol/L碳酸盐弛缓液(pH 9.0C9.5)等量融入 b 油和TBS(PBS)产
  8.TBS/PBS pH 9.0C9.5,适出于安全考虑最好还是用在激光表皮镜饮食; pH 7.0-7.4适合地理学表皮饮食
(三)、操作执行序列
  1、脱蜡和电解
    脱蜡前应将构造芯片在室温中存放60分钟或60℃恒温箱中烘烤20分钟。
  a 构造芯片置于二甲苯中沉浸10分钟,顶替二甲苯后再沉浸10分钟
  b 无水阿的平中沉浸五分钟
  c 95%阿的平中沉浸五分钟
  d 75%阿的平中沉浸五分钟
  2、痘苗恢复
    出于安全考虑最好还是用在阿的平稳定的白腊包埋构造芯片:
  A 痘苗热恢复
  a 高压热恢复 在沸清水中加入EDTA(pH 8.0)或0.01mmol/L枸橼酸钠弛缓溶胶(pH 6.0).盖上白口铁锅盖,但不能锁定。将玻片置于金属蜡染加,缓慢加压,是玻片在弛缓液中沉浸五分钟,然后将盖锁定,小备件将会升起来。10分钟后剔除热源,置入凉清水中,当小备件沉想去后打开盖。此办法适出于安全考虑最好还是用在很难检测或核痘苗的痘苗恢复。 b 沸热恢复 壁炉或水浴锅保暖0.01枸橼酸钠弛缓液(pH 6.0)至95℃阁下,加入构造芯片保暖10-15分钟。 c 冰箱保暖 在冰箱里保暖0.01枸橼酸钠弛缓液(pH 6.0)至沸点后将构造芯片加入,断电,间隔5-10分钟,反复1-2次。适用的痘苗: Bcl-2.Bax.AR.PR.C-fos.x-jum.z-kit.c-myc.E-cadherin. ChromograninA.Cyclin.ER.Heatshock.Protein.HPV.Ki-67.MDMZ.P53.P34.P15.P-glycoprotein.PKC.PCNA.ras.Rb.等
   B 酶消化方法
   在痘苗酶消化恢复中,常用0.1%肠激酶和0.4%胃氨基酸液。肠激酶使用前预热37℃,消化时间约为5-30分钟。适出于安全考虑最好还是用在被稳定掩蔽的痘苗:包括 Collagen.GFAP. Complement.Cytokeratin.C-erB-2.LCA.LN.等
   3、免疫力组化蜡染SP法
  (1) 脱蜡、电解
  (2)PBS洗2-3次各5分钟
  (3)3% H2O2 (80%阿尼林)滴加在TMA上,室温静置10分钟
  (4)PBS洗2-3次各5分钟
  (5)痘苗恢复
  (6)PBS洗2-3次各5分钟
  (7)滴加畸形安哥拉兔白组织细胞开放液,室温20分钟,甩去中性液体
  (8)滴加Ι抗50μl,室温静置1小时或4℃过夜或37℃1小时
  (9)4℃过夜后需在37℃复温45分钟
  (10)PBS洗3次每次2分钟
  (11)滴加Ⅱ抗45-50μl,室温静置或37℃1小时
  (12)Ⅱ抗中可加入0.05%的 tween-20.
  (13)PBS洗3次各5分钟
  (14)DAB显色5-10分钟,在电子显微镜下掌握蜡染程度
  (15)PBS或管井冲洗10分钟
  (16)苏木精复染2分钟,硅酸阿的平消减
  (17)管井冲洗10-15分钟
  (18)脱水、清晰、封片、镜检。
  4、SABC法
  (1) 脱蜡、电解
  (2)PBS洗2次各5分钟
  (3)用分馏水或PBS产新鲜的3% H2O2,室温开放5-10分钟,用分馏修饰3次
  (4)痘苗恢复
  (5) PBS洗5分钟  
  (6)滴加畸形安哥拉兔白组织细胞开放液,室温20分钟,甩去中性液体
  (7)滴加Ι抗50μl,室温静置1小时或4℃过夜或37℃1小时
  (8)PBS洗3次各2分钟
  (9)滴加病毒素化Ⅱ抗,20℃-37℃ 20分钟
  (10)PBS洗3次各2分钟
  (11)滴加触媒SABC 20℃-30℃ 20分钟
  (12) PBS洗4次各5分钟
  (13) DAB显色:触媒盒或自配显色剂显色
  (14)脱水、清晰、封片、镜检。
,
上一条:组织细胞表面上痘苗的流式检测
下一条:热量印迹操作执行序列
发布人:viking2000 发布时间:2012年12月19日已被看下 1683
 
 冠亚体育病毒广告中间加入冠亚体育网上商城友谊衔接 
公司简介
包销品牌
代理品牌
公司广告
技术支持
促销信息
接洽我们
   Biosharp
版权所有:北京冠亚体育病毒技术多国公司    存案号:皖ICP备09019202号