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透析袋的使用
发布人:viking2000    看下 2847 次    时间:2012年12月19日    
      透析技术自Thomas Graham 于1861年研发到现在已有一百多年的前史,它已成为病毒化学科学院最轻便,最常用的分开纯化技术之一。在病毒大份子的制备进程中,消除盐、足够有机触媒、小份子杂质、作品稀释和发生微量作品的弛缓系统等总要用到透析技术。
    病毒作品的透析只要使用专用的半透膜就可以达到。基本情况下是将半透膜制成袋状,将病毒大份子作品溶胶置入袋内,浸入水或弛缓液中,作品溶胶中的大份子量的病毒大份子被截留在袋内,而盐和小份子等养分反复放散透析到袋外,直到袋内、外两边的浓度达到平衡。留存在透析袋内未透析出的作品溶胶作为“留存液”,袋(膜)外的溶胶作为“渗出液”或“透析液”。
透析的作用力是放散压,放散压是由于高出膜两边的饱和浓度梯度引起的。透析的高效同欲透析的小份子饱和在膜内外两边的浓度梯度、膜的面积和温度成正比,与膜的高度成反比。改善温度可加快透析高效。为最大极限地维持病毒大份子的活性,基本情况下采用4℃透析。
    透析膜用植物膜和五金纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜。目前较常用的是美国Union Carbide (团结碳化物公司)和美国埃医学公司生产的各种长短的透析管,其截留份子量MwCO(即留在透析袋内的病毒大份子的最小份子量,缩写为MwCO)基本情况下从700到数万不等。
    商品化的透析袋可制成管状,其扁平高度为6~50 mm不等。为防干裂,出厂前一般都经10%的阿尼林处理,透析袋中富含微量的硫化物、非金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对氨基酸和添上病毒活性养分有害有毒,用前必须剔除。新购进的透析袋必须历经处理才能使用。50%的阿的平煮沸1小时,再依次用50%阿的平、0.01 mol/L硅酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶胶洗濯,再用分馏水冲洗后就可以运用。研究证实,50%阿的平处理对剔除具有紫外吸收的杂质非常最佳。使用后的透析袋洗净后可存于分馏清水中,置4℃留存。若长时刻不用,可加入足够的叠氮钠(NaN2),以抑制微病毒的生长。干的透析袋弯折时易出现洞,用时必须细心检查。
    历经处理的透析袋,使用时,一起用橡皮筋或草绳扎紧,也能够使用好好的透析袋夹夹紧,由另一起灌满分馏水,用巴掌稍加压,检查是不是漏液,确证无误后,再用分馏水洗净,才能装入待透析作品。装入作品时基本情况下要留三分之一至一半的空间,不要透析进程中,因透析作品中的小份子浓度较大,袋外的水和弛缓液过多进入袋内将袋涨破。含盐量很高的氨基酸溶胶透析过夜时,体积增加是畸形的,有的时候竟然最高会有50%前面说。透析可以使用上海、步弓和大关键词桶等灰斗,灰斗的大小以20-50:1为好。足够作品溶胶的透析,可在袋内放一截两端烧园的五金棒或两端封口的五金管,以使透析袋沉入液面以下。
    基本情况下就是为了掌握透析效果,有的时候需要对透析液中欲消除的小份子残留物进行总结,如甘氨酸、二甲基甲酰胺、阿尼林、戊二醛、硅酸根、偶联剂等。小份子残留物的检测总结方法很多,如 (NH4)2SO4用1%的BaCl2检查,NaCl、KCl等用1%的AgNO3 检查。有些检测方法比较复杂,或需要一定的情况,如确有必要可根据关于文献材料。
    就是为了加快透析高效,改善透析效率,除尽快顶替透析液外,还可运用磁场拌,还能够使用各种透析装配。运用者也能够自行方案与制造各种容易的透析装配。美国病毒医学公司(Biomed Instruments Inc.)生产的各种型号的Zeineh 透析器,由于使用传热透析的原理,使透析高效和效率大大改善。 

附:透析袋的处理
 1. 遵照需要,把透析管剪截成足够长短(10—20cm)。
 2. 在大体积的2%(w/v)硅酸氢纳和1mmol/L EDTA(pH8.0)大尉透析管煮沸10分钟。
 3. 用分馏水彻底清洗。
 4. 于EDTA(1mmol/L,pH8.0)中煮沸10分钟, 
 5. 或将透析管置盛有分馏水的上海内,高压沸点抗菌10分钟。
 6. 冷却后,存放于4℃。透析管必须确保一直浸于溶胶中。
 7. 从这个时候起取用透析管时总须戴手套。
 8. 用前将透析管用分馏水清洗洁肤后就可以运用。,
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